1、适当的细胞培养基
适当的细胞培养基是体外细胞的生长和增殖zui培养基不仅提供细胞营养和促进细胞生长增殖的基本物质，还提供培养细胞生长繁殖的生活环境。
2、血清
目前，大多数合成培养基都需要添加血清.血清是细胞培养液zui其中一个重要成分是细胞生长所需的各种生长因子和其他营养物质。
3、无菌无毒细胞培养环境
无菌无毒的操作环境和培养环境是保证细胞在体外成功培养的首要条件.由于体外培养的细胞对微生物和有毒物质缺乏防御能力，一旦被微生物或有毒物质污染或自身代谢物积累，就会导致细胞中毒死亡.因此，在体外培养细胞时，必须保持细胞生存环境无菌无毒，及时清除细胞代谢物。
4、恒定细胞生长温度
为了保持培养细胞的旺盛生长，必须有恒定和合适的温度.不同种类的细胞对培养温度有不同的要求.人体细胞培养的标准温度为36.5℃±0.5℃,偏离这个温度范围，会影响细胞的正常代谢，甚至死亡.培养细胞对低温的耐受性比高温强，温度上升不超过39℃时,细胞代谢与温度成正比；39-40个人体细胞℃1小时可能会受到一定程度的伤害，但仍有可能恢复；40-41℃细胞一般在1小时内受损，只有少数可能恢复；41-42℃1小时内，细胞受到严重损伤，大部分细胞死亡，个别细胞仍有恢复的可能；当温度为43时℃所有细胞在上述1小时内死亡.相反，温度不低于0℃时,虽然对细胞代谢有影响，但没有伤害；将细胞放入25-35℃当细胞仍能生存和生长时，但速度减慢；4℃几个小时后，回到37℃细胞可以继续生长.随着温度的降低，细胞代谢减慢.当温度下降到冰点以下时，细胞会因细胞结冰而死亡.但是，如果在培养液中加入一定量的冷冻保护剂(二甲亚啶或甘油)，可在深低温下如-80℃或-196℃(液氮)长期保存。
5、适宜的气体环境
气体是哺乳动物细胞培养生存的必要条件之一，主要需要氧气和二氧化碳。
6、适宜的环境湿度
7、适当的光照条件
