9
15106375376
场地选择：液相色谱仪应安装在水平、稳固的实验台上，台面需能承受仪器及相关配件的重量。仪器周围要预留足够空间，方便操作、维护以及通风散热，距离墙面至少 15 - 20 厘米。同时，要避免将仪器放置在阳光直射、高温、高湿或有强磁场、腐蚀性气体的环境中，理想的环境温度为 20 - 25℃，相对湿度在 40% - 65%。
试剂准备：流动相必须使用 HPLC 级别的试剂，确保分析结果的准确性。根据实验需求，精确配制不同比例的水相和有机相混合流动相。若流动相含有无机盐、表面活性剂等固体溶质，建议采用加热法溶解，避免使用振摇、超声等方式，以防溶质处于 “临界胶团浓度"，后续遇有机溶剂或温度剧降时析出结晶，损伤仪器和色谱柱。配制好的流动相需进行过滤与脱气处理。过滤可使用 0.45μm 或 0.2μm 的混合型过滤膜，以去除颗粒杂质；脱气方法多样，如吹氦脱气法，在 0.1MPa 压力下，以约 60mL/min 流速向流动相储液容器中通入氦气 10 - 15min，能有效排除约 80% 的氧气，但成本较高；加热回流法脱气效果好，但要注意冷凝塔冷却效率，防止溶剂丢失和混合比例变化；抽真空脱气法可降压至 0.05 - 0.07MPa 除去溶解气体，但可能改变混合溶剂组成，多用于单溶剂体系；超声波脱气法将流动相置于超声波清洗器中震荡 10 - 20min，效果相对较差；在线脱气法使用简单、低故障且有效，建议购买仪器时配备在线脱气机。
仪器检查：在安装前，仔细检查液相色谱仪各部件是否齐全、有无损坏，如泵、进样器、检测器、柱温箱、色谱柱等。检查仪器的电源线、数据线、管路连接头等是否完好无损，确保仪器在运输过程中未受到物理损伤。同时，确认随机附带的说明书、保修卡、配件清单等资料是否完整。
硬件安装：按照仪器说明书，将液相色谱仪的各个部件依次安装在实验台上。首先安装泵，确保泵体水平放置，固定牢固，连接好电源线和输液管路。然后安装进样器，将其与泵的输出管路连接紧密，注意接口处的密封，防止漏液。接着安装柱温箱，将色谱柱正确安装在柱温箱内，连接好柱前和柱后的管路，确保流动相能顺畅通过色谱柱。最后安装检测器，根据检测器类型（如紫外检测器、荧光检测器等），连接好相应的信号线和流动相管路。在连接所有管路时，要注意管路的走向，避免管路扭曲、打折，确保流动相流通顺畅。
色谱柱安装：安装色谱柱时，先确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。拧下柱两头的密封堵头，按柱管上标明的流动相流向，将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口连接，柱的出口与检测器连接。连接管一般为外径 1.57mm、内径 0.1 - 0.3mm 的不锈钢管，两头配有空心螺钉及密封用压环。连接时，将连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底，然后顺时针拧紧空心螺钉，直至拧不动，再用扳手顺时针拧 1/4 - 1/2 圈。若色谱柱加压后有漏液现象，用扳手再顺时针拧 1/4 圈，直至不漏液。安装过程中要注意避免碰撞色谱柱，防止柱内填料受损。同时，确保接头与柱头深度匹配，若接头比柱头深，可能导致漏液；若柱头比接头深，则会产生死体积，使谱带展宽和峰拖尾。此外，若新色谱柱内贮存的溶剂与流动相不匹配，特别是当流动相含有缓冲盐时，需进行溶剂转换。例如，正相柱通常用正己烷保存，转换到 HILIC 模式时，需使用二氯甲烷或乙酸乙酯作为过渡溶剂。
软件安装与连接：对于配备有控制软件的液相色谱仪，按照软件安装指南，将软件安装在配套的计算机上。安装完成后，通过数据线将仪器与计算机连接，打开仪器电源和计算机，运行软件，进行仪器与软件的通讯设置，确保两者能够正常通讯。在软件中设置仪器的各项参数，如泵的流速、进样体积、检测器波长、柱温等初始参数。
开机与初始化：打开液相色谱仪的各个部件电源，如泵、检测器、柱温箱等，等待仪器进行自检和初始化。在自检过程中，仪器会自动检测各部件的工作状态，如泵的压力、流量，检测器的光路等。若自检过程中出现故障提示，需根据提示信息排查故障，常见故障如泵头漏液、管路堵塞、检测器光源故障等。排除故障后，重新进行自检，直至仪器初始化完成。
流动相平衡：在仪器初始化完成后，将配制好并经过过滤、脱气处理的流动相连接到泵的输液管路上。开启泵，以较低流速（如 0.2 - 0.5mL/min）冲洗系统，排除管路中的气泡。待气泡基本排除后，逐渐将流速提升至实验所需流速（一般内径 4.6mm 的色谱柱，流速可选 1mL/min；内径 4.0mm 柱，流速 0.8mL/min 为佳），对色谱柱和整个系统进行平衡。平衡时间根据实验情况而定，一般需要 30 - 60 分钟，直至基线稳定。若流动相中含有表面活性剂，建议前一晚小流速过夜，第二天上班后将流速增至正常，再平衡 1 小时后开始实验。在平衡过程中，密切关注泵的压力变化和基线波动情况，若压力过高或基线波动较大，可能存在管路堵塞、气泡未排尽或流动相污染等问题，需及时排查解决。
样品准备与进样：将待测样品用流动相溶解，确保样品溶解且浓度在仪器检测范围内。若样品中含有强极性或与柱填料发生不可逆吸附的杂质，需使用预处理柱进行去除。同时，使用 0.45μm 的过滤膜过滤样品，去除微粒杂质，防止堵塞进样器和色谱柱。对于手动进样，用微量注射器吸取适量样品，将注射器针头插入进样阀的进样口，按照进样阀的操作说明，切换进样阀至进样位置，将样品注入系统；对于自动进样器，将处理好的样品放置在自动进样器的样品盘中，在软件中设置好进样序列、进样体积等参数，自动进样器会按照设定程序依次进样。
运行分析：在进样完成后，在软件中设置好分析方法，包括流动相的梯度洗脱程序（若为梯度洗脱）、柱温、检测器波长、数据采集时间等参数。点击运行按钮，仪器开始按照设定的分析方法运行，样品在色谱柱中分离后进入检测器，检测器将检测到的信号转化为电信号传输给计算机，软件实时采集并记录数据，生成色谱图。在分析过程中，观察仪器的运行状态和色谱图的出峰情况，如保留时间、峰形、峰面积等。若出现异常情况，如峰形拖尾、分叉、保留时间漂移等，需分析原因并进行调整，可能原因包括色谱柱性能下降、流动相比例不准确、样品污染等。
数据处理与结果分析：分析结束后，软件会自动对采集到的数据进行处理，如积分、计算峰面积、保留时间等。根据实验目的，对处理后的数据进行分析，与标准品的色谱图对比，确定样品中各组分的含量。在数据处理过程中，可根据实际情况调整积分参数，如斜率、峰宽等，确保积分结果准确可靠。同时，对实验数据进行记录和保存，以便后续查阅和分析。
清洗与关机：实验结束后，需要对仪器进行清洗。若流动相仅为乙腈 - 水或甲醇 - 水，继续以 1.0mL/min 的流速冲洗色谱柱 30 分钟，柱温保持试验时温度。若流动相含有无机盐、表面活性剂或三乙胺、高氯酸等物质，先采用纯水（或含有 2% 甲醇）冲洗 A 管路（试验采用哪个管路，就要冲洗该管路）30 分钟，流速 1.0mL/min，柱温可较试验温度高出 5 - 10℃；随后更换成 20% 甲醇再冲洗 30 分钟，流速 1.0mL/min，关闭柱温箱加热装置。冲洗完成后，关闭泵、检测器、柱温箱等仪器部件的电源，关闭计算机和软件。同时，清理实验台面，将流动相、样品等试剂妥善保存，处理好实验废弃物。
正确安装和规范使用液相色谱仪是获得准确分析结果的基础，操作人员需严格按照上述步骤和注意事项进行操作，并定期对仪器进行维护保养，以确保仪器长期稳定运行 。
请输入账号
请输入密码
请输验证码
以上信息由企业自行提供，信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责，好博体育设备网对此不承担任何保证责任。
温馨提示：为规避购买风险，建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。
